材料與方法
恒溫培養箱(DNP-9272 型):上海精宏實驗設備有限公司;高壓均質機(APV1000 型):美國 SPX 集團; 離心機(H1650-W 型):湖南湘儀實驗室儀器開發有限 公司;超純水系統(milli-Q direct 8 型):法國 Millipore 公司;高效液相色譜儀(1260 Infinity 型):美國 Agilent Technologies 公司;酸度計(PHS-3E 型):上海雷磁儀 器廠;凝膠圖像分析系統(3026 型):法國 VILBER 公 司;聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR) 儀(Nexus+x2eco 型):德國艾本德公司。140 株乳酸菌:江蘇省乳品生物技術與安全控制重 點實驗室保存;大豆、白砂糖:揚州市邗江區永輝超市; 七葉苷、二甲亞砜:生工生物工程(上海)股份有限公 司;染料木素、大豆苷元標準品:上海源葉生物科技有 限公司;檸檬酸鐵、甲醇、磷酸(色譜純)、乙腈(色譜純): 國藥集團化學試劑有限公司;以上試劑均為分析純。
結果與分析
β-葡萄糖苷酶作用下,七葉苷水解成葡萄糖和 七葉素,七葉素可與 Fe3+反應呈現棕黑色。將實驗室 保存的 140 株供試菌株接種于添加七葉苷和檸檬酸鐵 的特殊固體培養基,培養 48 h 后變為棕黑色的孔,即 為產酶目標菌株,根據顏色深淺初步判斷酶活高低, 結果表明產酶目標菌株一共有 12 株,菌株編號分別為 11、39、54、58、117、128、m64、m91、m113、Y-5、A28 1-2、 90-2-2。原豆乳中大豆異黃酮苷元總量為 7.15 mg/L,豆乳 經產酶目標菌株發酵后大豆異黃酮苷元總量均有顯 著提高(P<0.05)。翟清燕等將不同菌株用于發酵豆 乳,得到一株大豆異黃酮苷元產量最高的乳酸菌,約 為原豆乳的 8 倍。本研究中,有 7 株乳酸菌發酵后大 豆異黃酮苷元總量在 55 mg/L 以上,其中產大豆異黃 酮苷元能力最強的是菌株 58,顯著高于除菌株 m91 外的 10 株菌。菌株 58 發酵后大豆異黃酮苷元總量達 59.64 mg/L,約為原豆乳的 8.25 倍,菌株 m91 次之,總 量達 58.06 mg/L,約為原豆乳的 8.12 倍。菌株 128、 m113 發酵產大豆異黃酮苷元能力最弱,發酵后大豆異 黃酮苷元總量不到 45.00 mg/L。