隨著我國經濟和飼料工業的迅速發展,各類飼料及食品添加劑的 使用也日益增加。煙酸(niacin),屬于 B 族維生素,是機體維持生 理功能的必須營養素。除了作為機體必須的營養素外,煙酸具有全 面的調血脂作用,而近年來煙酸作為營養藥物、食品及家畜飼料添加 劑中的主要成分更是受到廣泛的關注。煙酸的營養支持及機體代謝 調節作用基礎目前尚未完全揭示,其是否具有抗氧化活性目前研究甚 少。本文以煙酸為研究對象,研究其體外抗氧化活性,以期為飼料及 食品添加劑煙酸的營養支持作用提供一定的理論基礎和依據。
752型紫外可見分光光度計(上海光譜儀器有限公司); Secura324-1CN精密天平(德國賽多利斯分析天平);恒溫水浴鍋(上海精宏實驗設備有限公司)。
煙酸(NA)、1,1- 二苯基苦基苯肼(DPPH)、1,10- 菲羅啉均購 自美國 Sigma-Aldrich 公司;L- 抗壞血酸(維生素 C)、H2O2、硫酸亞 鐵、乙醇、硫代巴比妥酸、三氯乙酸均為分析純。
取 2.1mM1,10- 菲羅啉溶液 1mL 置入試管中,加入 2mL 磷酸鹽緩 沖溶液(PBS)和 1mL 雙蒸水混勻,再加入 1mL 硫酸亞鐵溶液混勻, 最后加入1mL H2O2溶液,37℃溫育60min,在536nm波長下測定吸光度, 為A(損);用1mL蒸餾水代替H2O2,測的吸光度值為未損傷管A(未); 用不同濃度樣品溶液代替雙蒸水,測出的吸光度為 A(樣)。 清除率(%)=[A(樣)-A(損)]/[A(未)-A(損)]×100
取不同濃度樣品溶液 2mL 和 DPPH• 溶液 2mL 加入到試管中搖勻、 室溫靜置 30min,在 517nm 波長處測定吸光度值 Ai ;在 2mL DPPH• 標準溶液中加入 2mL 無水乙醇,震蕩混合,在 517nm 波長處測定吸 光度值 A0;試管中加入 2mL 不同濃度的樣品溶液和 2mL 無水乙醇, 搖勻、避光放置 30min 后,在 517nm 波長處測定吸光值 Aj 。 清除率(%)=[1-(Ai -Aj )/A0]×100%
新鮮雞蛋去卵清,卵黃用等體積的 PBS 緩沖液配制成 1:1 的卵黃 懸液,同方向勻速攪拌 10min,再用 PBS 稀釋成 1:25 的卵黃懸液。吸 取卵黃懸液 0.2mL,分別加入 0.1mL 不同濃度樣品溶液,0.2mL 25mM 硫酸亞鐵溶液,加入 1.5mL PBS 緩沖液,在 37℃水浴下反應 30min, 加 1mL 20% 三氯乙酸,混勻 3500r/min 離心 15min,取上清液 2mL, 加 1mL 0.8% 硫代巴比妥酸溶液,沸水浴 15min 冷卻后 532nm 下測定 吸光度值,以 0.1mL 蒸餾水代替樣品作為空白對照管。 清除率 =(A0-A)/A0×100% 其中,A0 為空白對照管吸光度,A 為樣品吸光度。
在試管中加入 0.5mL 樣品溶液,2.5mL 的 PBS 緩沖液和 2.5mL 鐵 氰化鉀溶液,震蕩均勻,50℃水浴 20min,流水冷卻,然后加入 2.5mL三氯乙酸溶液。混勻后,用 3000r/min 離心 10min。吸取上清液 2.5mL 置于新的離心管中,再加入 2.5mL 蒸餾水和 0.5mL 三氯化鐵溶液,混 合均勻后,用紫外分光光度計在 700nm 波長下測定吸光度。
機體過量的自由基則會引起蛋白質變性、酶失活、多糖降解、 DNA 鏈斷裂、生物膜結構損傷、細胞解體乃至機體病變和死亡。從 圖1結果可知,隨著煙酸濃度增加,其對羥基自由基的清除率逐漸增大。 當煙酸濃度為 0.5mg/mL 時,羥基自由基清除率為 21.83%,表明煙酸 具有一定的清除羥基自由基的作用。
DPPH 自由基溶液在 517nm 處有強吸收,每個 DPPH 分子在溶液 中可生成一個穩定的含氮自由基,當它與提供 1 個電子的自由基清除 劑作用時,生成無色產物使溶液的典型紫色變淺。圖 2 表明,隨著煙 酸濃度的增加,其對 DPPH 自由基的清除率增大,揭示煙酸具有一定 的體外抗氧化活性。
隨著煙酸濃度的增加,煙酸對卵黃脂蛋白體系中脂質過氧化作用 抑制率也隨之增加,其抑制作用與煙酸濃度呈現一定的量效關系。煙酸對卵黃脂蛋白脂質過氧化物有較好的抑制作用,最大抑 制率為 61.02%。
旋壓成型技術作為金屬回轉體加工中新興的一種特種成型技術, 自產生以來,已經做了大量的理論研究工作,應用也日益廣泛,但 對旋壓超薄壁件的研究相對甚少,尚沒有形成較為全面、系統、可靠 的超薄壁旋壓基礎理論及質量控制體系給予技術支持。上述深筒薄壁 銅零件的旋壓成型工藝對類似深筒薄壁零件旋壓提供了很好的借鑒作 用。在實際加工中,還需要通過不斷的試驗和積累,才能選出合適的 加工方案,旋壓加工出合格的產品。