大葉白麻（Poacynum hendersonii（Hook.f.）Woods）， 又稱大花羅布麻，工業(yè)上和羅布紅麻并稱羅布麻，夾 竹桃科（Apocynaceae），白麻屬（Poacynum），為直立半 灌木，高 0.5 m~2.5 m，一般高 1 m 左右，花期 4 月~9 月 （盛開期 6 月~7 月），果期 7 月~12 月（成熟期 9 月~10 月），植株含乳汁，生長(zhǎng)于鹽堿荒地和沙漠邊緣及河流 沖積平原水田和湖泊周圍，分布在我國(guó)新疆、甘肅、青 海等省區(qū)。由于大葉白麻具有延緩衰老、降壓、降脂、 抗感冒、鎮(zhèn)靜安神等功效，大葉白麻已被廣泛應(yīng)用于藥用保健業(yè)。

1 材料與方法

1.1 儀器

真空干燥箱：上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；DLSBFZ 低溫循環(huán)真空泵：鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；Q02 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：艾拓思實(shí)驗(yàn)設(shè)備（上海）有限公司；FT-IR紅外光譜儀 ME-113（美國(guó)）：上海精密儀器儀表公司； SONICS 超聲波破碎儀（美國(guó)）1kw：上海芃奇科學(xué)儀器 有限公司；H2050R 臺(tái)式高速離心機(jī)：湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司。

1.2 材料與試劑

大葉白麻莖：新疆塔里木盆地。 石油醚、乙醚、無(wú)水乙醇、氯仿、正丁醇、丙酮、活性 炭、碘化鉀試劑、考馬斯亮藍(lán)試劑、濃硫酸、蒽酮、α-萘 酚等化學(xué)試劑：廣州市雨韶貿(mào)易有限公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作和換算系數(shù)的計(jì)算

精確稱取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 50.4 mg，置于 100 mL 容 量瓶中，定容，得葡萄糖標(biāo)液 A。分別取 1、2、3、4、5 mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 A 置于 25 mL 容量瓶，定容，得 5 個(gè) 梯度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。取 5 個(gè)梯度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 各 1 mL 置于 10 mL 具塞試管，另取 1 mL 超純水作為 空白對(duì)照，在 6 個(gè)比色管加入 0.2 %蒽酮-硫酸溶液 4 mL，冰水浴 10 min，取出立即沸水浴 15 min，冷卻至 室溫，在 620 nm 處測(cè)其吸光度，作 A-C 標(biāo)準(zhǔn)曲線。 大葉白麻莖多糖實(shí)際濃度與測(cè)定濃度換算系數(shù)： 稱取精制大葉白麻莖多糖 10.002 mg，置于 100 mL 容 量瓶，得 100.002 mg/L 多糖溶液，使用蒽酮-硫酸法在 620 nm 處測(cè)其吸光度，代入 A-C 標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到其測(cè) 定顯示濃度 C0。C 與實(shí)際濃度 L 的換算系數(shù) X=50.2/C0。

1.3.2 精制大葉白麻多糖純度的鑒定

碘-碘化鉀反應(yīng)：取 1 mL 大葉白麻多糖樣品制成 的溶液，加入碘-碘化鉀溶液，觀察顏色變化。 考馬斯蘭顯色反應(yīng)：取 1 mL 大葉白麻多糖樣品制 成的溶液，加入 0.5 mL 0.1 %的考馬斯蘭乙醇溶液，混 勻，煮沸 1 min~2 min，冷卻觀察顏色反應(yīng)。 Molish 反應(yīng)：取 1 mL 大葉白麻多糖樣品制成的溶 液，加入 2 滴 Molish 試劑，搖勻，沿管壁慢慢加入 1mL 濃硫酸，觀察濃硫酸與糖交界面顏色的變化。

1.3.3 多糖含量的測(cè)定與計(jì)算

將提取液進(jìn)行一定稀釋后，運(yùn)用蒽酮-硫酸法測(cè) 定并計(jì)測(cè)定濃度 C。大葉白麻莖多糖含量W= X×C×250 1 000×m 式中：X 為換算系數(shù)。

1.3.4 大葉白麻多糖提取方法的優(yōu)化

單因素試驗(yàn)：對(duì)液料比、超聲強(qiáng)度、乙醇添加量、超 聲時(shí)間幾個(gè)因素對(duì)提取得率的影響進(jìn)行探究。 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)：根據(jù)單因素結(jié)果設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

液料比 10∶1（mL/g），超聲強(qiáng)度 35 %×1 kW，超聲 時(shí)間 40 min，乙醇添加量 0，每次提取完過(guò)濾濾液后， 加入新的萃取劑，進(jìn)行再一次萃取。料液比 A、超聲強(qiáng)度 B、提取時(shí)間 C、提取次數(shù) D 對(duì)多糖提取得率均有顯著影響，液料比 A、提取時(shí)間 C、提取次數(shù) D 對(duì)提取得率有極顯著影響。除料液比 A 和提取時(shí)間 C 的交互因素外，4 個(gè)因素的其它交互因 素對(duì)提取得率均有顯著影響。通過(guò)三維曲面可以判斷各因素對(duì)提取得率影響 的顯著性及各因素之間交互作用的強(qiáng)弱。6 個(gè)三維曲 面圖形均為上凸形，且最高點(diǎn)落在所選區(qū)域內(nèi)，可以 說(shuō)明因素水平選擇合理；多糖提取得率隨液料比、超 聲強(qiáng)度、超聲時(shí)間的增大呈現(xiàn)先升高后降低的二次關(guān) 系，隨超聲次數(shù)的增加，提取得率先升高后呈現(xiàn)較穩(wěn) 定趨勢(shì)。

3 結(jié)論

本研究采用響應(yīng)面對(duì)大葉白麻莖中多糖的提取 工藝進(jìn)行了優(yōu)化，建立了多糖提取的數(shù)學(xué)模型。評(píng)價(jià) 了液料比、超聲強(qiáng)度、提取時(shí)間、提取次數(shù)對(duì)提取得率 的影響，其中液料比、超聲時(shí)間、提取次數(shù)對(duì)提取得率 的影響極為顯著，超聲強(qiáng)度對(duì)提取得率的影響顯著； 由試驗(yàn)結(jié)果得最佳提取工藝為：液料比 15∶1（mL/g）， 超聲強(qiáng)度 35 %×1 kW，提取時(shí)間 45 min，提取次數(shù) 2次，在此條件下的多糖提取得率為 1.565 %。本研究 所確定的多糖提取方法操作簡(jiǎn)便，提取得率相對(duì)于 傳統(tǒng)水提法高，方便于對(duì)大葉白麻及其多糖的進(jìn)一步利用。