兩頭尖藥材為毛茛科植物多被銀蓮花 Anemone raddeana Regel 的干燥根莖,性辛、熱; 有毒。歸脾經。具有祛風 濕、消癰腫的功效。研究表明其具有顯著的抗腫瘤、抑 菌、抗炎鎮痛等作用。臨床上被廣泛應用,如被患者熟 知的中成藥活絡丹、再造丸,其主要成分就是兩頭尖。 近年 來,紅外光譜檢測技術廣泛的應用于各個領 域,包括中藥材、中藥炮制、中成藥的質量控制等方 面。
1 材料
Vector 33 型傅立葉變換紅外光譜儀 ( 德國 Bruker 公 司) ; DZF-6050 型真空干燥箱 ( 上海精宏實驗設備有限公 司) ; AB-135-S 型電子天平 ( 梅特勒-托利多儀器上海有限 公司) ; FZ102 微型植物試樣粉碎機 ( 北京市永光明醫療儀 器廠) 。溴化鉀 ( 光譜純) 。兩頭尖藥材經長春中醫藥大學 肖寄平教授鑒定均為毛莨科銀蓮花屬多被銀蓮花 Anemone raddeana Regel 的干燥根莖,信息見表 1。3 個混淆品為天 葵子、九節菖蒲、香附。
2 方法
2. 1 樣品處理
采用溴化鉀壓片法。取兩頭尖藥材, 粉碎,過 200 目篩,在 115 ℃ 干燥至恒定質量,備用。精 密稱取樣品粉末 2 mg,KBr 100 mg,置瑪瑙研缽中混合研 磨,均勻放入模具內,12. 5 MPa 下作用10 min,壓片,所 壓出來的片子應為透明的薄片,作為樣品片。同法制得KBr 空白片。
2. 2 光譜條件
中紅外檢測器 ( 德國 Bruker 公司) ; 數據處理系統 OPUS 5. 0; 分辨率 4 cm-1 ; 掃描次數 32 次; 掃描范圍 4 000~ 400 cm-1 。
2. 3 數據預處理
每個樣品測定 3 次,所有圖譜進行基線 矯正,歸一化處理,然后將各次測得的光譜曲線做平均處 理,得到平均圖譜,再對圖譜作 13 點平滑,即得。
2. 4 方法學驗證
2. 4. 1 精密度試驗
取同一產地的兩頭尖藥材,按 “2. 1” 項下方法處理,連續測定 6 次,測得樣品紅外圖譜間相關 系數的平均值為 0. 999 9,RSD 為 0. 008 4% ( n = 6) 。表明 儀器精密度良好。
2. 4. 2 穩定性試驗
取同一產地的兩頭尖藥材,按 “2. 1” 項下方法處理,置干燥器內保存,分別于 0、1、2、4、6、 8、12 h 進樣,測得各樣品紅外譜圖間相關系數的平均值為 0. 999 0,RSD 為 0. 094 17% ( n = 7) 。表明樣品在 12 h 內 穩定性良好。
2. 4. 3 重復性試驗
取同一產地的兩頭尖藥材 6 份,按 “2. 1”項下方法處理,用紅外光譜儀測定。測得各樣品紅 外譜圖間相關系數的平均值為 0. 998 9。RSD 為 0. 123 8% ( n = 6) ,表明該方法重復性良好。
3 討論
本研究將 18 批兩頭尖藥材和 3 個混淆品,采用溴化鉀 壓片法進行紅外光譜測定。將所得圖譜處理后,加以分析。 從而確定共有峰,計算相似度,結果顯示,樣品之間的相 似度均值為 0. 991 7,相似度比較高,同比之下煙臺和濟南 樣品的相似度相對比較低。表明這 2 種樣品和其他產地樣 品相比較,成分略有差異,但相似度也在 0. 97 以上。而 3 個混淆品的相似度值較低,表明混淆品的成分和正品相比 較差別較大。通過相似度分析表明,兩頭尖藥材的紅外光 譜指紋圖譜的共有模式可以與混淆品種相區別,具有鑒別 藥材真偽的作用,表明用紅外光譜法建立的兩頭尖藥材的指紋圖譜,可以作為其質量評價的一種手段。
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