1 儀器與材料
1.1 儀器
1260 型高效液相色譜(HPLC)儀(G1311C 四 元泵、G1316A 柱溫箱、G1329B 全自動進樣器和 G1315D 二極管陣列檢測器),購自美國安捷倫科技 公司;色譜柱為 Aglient TC-C18(250 mm×4.6 mm, 5 μm),購自美國安捷倫科技公司; Sartarius CPA225D 型電子分析天平[賽多利斯科學儀器(北 京)有限公司];KQ-500DB 型超聲儀(昆山市超聲 儀器有限公司);恒溫水浴鍋(上海精宏實驗設備有 限公司);UNICO2012-PCS 型紫外可見分光光度 [優尼柯(上海)儀器有限公司];旋轉蒸發儀(上 海申生科技有限公司)。
1.2 材料
對照品咖啡酸(批號 Y17D6C7672)、連翹酯苷 B(批號20140120)、木犀草苷(批號 Y23S7H21785)、 毛蕊花糖苷(批號 PMO321SA14)、異毛蕊花糖苷 (批號 HA0820KA29)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷 (以下簡稱芹菜素糖苷,批號 P20N6F6297)、木犀 草素( 批 號 YO1D6S6815 )、 蘆 丁 ( 批 號 P29D4F6327)、沒食子酸(批號 Y15D6R6713)、齊 墩果酸(批號 20170423)均購于上海源葉生物制藥 公司,且質量分數均大于 98%;乙腈為色譜純(安 徽天地高純溶劑有限公司),乙醇、甲醇、福林酚、 高氯酸、冰醋酸、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、 碳酸鈉和香草醛均為分析純,水為 Merck Millipore 純水機制備的超純水。
2 方法與結果
參考黃梅等的提取工 藝方法,稱取 5 g 裸花紫珠樣品粉末(過 20 目篩), 按料液比 1∶17,62%乙醇,超聲提取 42 min,提 取 2 次。將提取液置于 65 ℃下旋轉蒸發 6 min,轉 置于 15 mL 蒸發皿,烘干至恒定質量,得干浸膏, 并計算浸膏得率。用少量 70%乙醇溶解并轉移至 50 mL 量瓶中,定容,再移取 1~5 mL 量瓶定容,即 得裸花紫珠供試液。Agilent-TC C18 色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相為乙腈(A)-0.4%磷 酸(B),梯度洗脫為 0~30 min,8%~16% A;30~ 45 min,16%~21% A;45~55 min,21%~24% A; 55~65 min,24%~35% A;65~70 min,35%~100% A;體積流量 1.0 mL/min;檢測波長 330 nm;柱溫 30 ℃;進樣量 10 μL。
3 討論
臨床上使用的裸花紫珠片、裸花紫珠膠囊等各 種中成藥均是以葉子所提取的浸膏單方入藥制成, 黃酮類、酚酸類及皂苷類成分為其主要的活性成分。 課題組前期在系統分析裸花紫珠近 200 種成分基礎 上,篩選出了被定量過的,具有止血、消炎活性且 具有種屬特異性的 7 種單體成分,連同浸膏得率、 總黃酮、總酚酸及總皂苷共 11 個指標作為評價指 標,使研究結果更為系統和全面。
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